Бактериальный посев на флору и чувствительность. Расшифровка посева мочи на флору

Содержание

Бактериологический посев – это анализ, выявляющий в том числе чувствительность патогенного микроорганизма к антибактериальным лекарственным средствам. С помощью этого метода исследования биологического материала специалисты определяют тип возбудителя инфекции, его концентрацию и патогенность, что помогает врачу назначить адекватное, эффективное для конкретного клинического случая специфическое лечение.

Что такое посев на чувствительность к антибиотикам

Посев на чувствительность, называемый еще бакпосевом на микрофлору – это вид исследования, применяемый при диагностике венерологических, гинекологических, урологических, дерматологических и других инфекционных заболеваний. После забора биологического материала производится его посев в различные питательные среды. Спустя некоторое время «разросшиеся» на нем в результате искусственного культивирования микроорганизмы тестируют на чувствительность к разным типам антибиотиков или противомикробных препаратов.

Исследование, называемое антибиотикограммой, демонстрирует, от препаратов какой фармакологической группы быстрее всего погибнет возбудитель инфекции. Кроме того, анализ определяет концентрацию патогенных микроорганизмов (выражается в КОЕ/мл, называемых колониеобразующими единицами), их резистентность (устойчивость) по отношению к медикаментозным средствам и внешним факторам. Для проведения исследования могут забираться следующие биоматериалы:

  • кровь;
  • урина;
  • желчь;
  • сперма;
  • спинномозговая жидкость;
  • слизь из уретры;
  • слизь из цервикального канала;
  • слизь из зева;
  • слизь из носоглотки;
  • мокрота;
  • содержимое кисты;
  • содержимое очага воспаления;
  • раневое отделяемое;
  • грудное молоко;
  • секрет простаты.

Выращивание колоний патогенных микроорганизмов на исследуемых материалах проводят в чашках Петри, либо сначала в жидкой среде, а затем на скошенном агаре в термостате на протяжении суток. После штаммы полученной культуры переносят на предметное стекло, окрашивают и изучают морфологические свойства микроорганизма под микроскопом. Внимание обращают на размер и форму клеток и их тинкториальные свойства (отношение к окрашиванию).

Показания

Бакпосев на микрофлору широко применяется в медицинской практике при диагностике инфекционно-воспалительных заболеваний (в гинекологии, урологии, венерологии, отоларингологии, хирургии и других областях), и при риске развития сепсиса (системной реакции на развивающееся воспаление). Анализ на чувствительность к антибиотикам позволяет выявить и вывести возбудителей следующих заболеваний:

  • бактериальный вагинит;
  • инфекционные ЗППП (заболевания, передающиеся половым путем);
  • хламидиоз;
  • гонорея;
  • трихомониаз;
  • цистит;
  • кишечная инфекция;
  • пневмония;
  • туберкулез;
  • ангина и мн. др.

При беременности

Определение чувствительности к антибиотикам при беременности проводится как минимум дважды – сразу после постановки на учет и на 36 неделе. Делается мазок из влагалища и со слизистой оболочки зева и носоглотки. Биоматериал исследуют, определяют наличие урологических и мочеполовых инфекций и золотистого стафилококка – возбудитель, провоцирующий гнойный мастит, послеродовой сепсис и др. инфекции в период после родоразрешения. При наличии показаний (заболевания почек, повышенный уровень лейкоцитов в моче и др.) могут назначаться:

  • посев мочи;
  • мазок из шейки матки;
  • соскоб влагалищного эпителия;
  • бактериальный посев из цервикального канала.

Виды исследуемых микроорганизмов

В зависимости от типа биоматериала и показаний к проведению анализа по результатам исследования выделяют следующие виды патогенных возбудителей бактериальных инфекций:

  1. Слизь из носоглотки и зева: золотистый стафилококк, гемолитический стрептококк, менингококк, листерия, коринебактерия дифтерии, гемофильная палочка, синегнойные пневмококки.
  2. Гнойное отделяемое, содержимое ран, биопунктат: синегнойная палочка, псевдомонада.
  3. Урогенитальная слизь: бактериальная флора, возбудители мочеполовых инфекций (микоплазма, гарднерелла, уреаплазма, трихомонада, грибы, гонококк, листерия).
  4. Каловые массы: тифопаратифозная бактериальная группа, кишечная группа (иерсинии, сальмонеллы, шигеллы), анаэробные возбудители пищевых инфекций, условно-патогенные возбудители кишечных инфекций.
  5. Кровь исследуют на стерильность.
  6. Остальные биожидкости – на обсемененность (бактериальную флору).

Подготовка к анализам

По статистике, около 80% ошибок в лабораторных исследованиях вызваны ошибками при сборе и транспортировке материалов для обследования. Как правило, забор осуществляет медицинский персонал, но некоторые биоматериалы больной собирает сам. Поэтому при подготовке к сдаче анализа необходимо соблюдать следующие общие правила:

  • Во время забора биоматериала требуется исключить попадание в него антисептических или дезинфицирующих соединений, обсеменения бактериями и иными организмами. Для этого инструментарий и посуда для сбора должны быть стерильными.
  • На результаты посева на антибиотики влияет прием пациентом антибактериальных и иных медикаментозных препаратов. О терапии необходимо сообщить назначившему анализ врачу, применение лекарств необходимо приостановить за срок не менее 10 суток до назначенной даты анализа.
  • Материалы для обследования должны быть доставлены в лабораторию в специальных герметичных контейнерах в максимально короткие сроки. Во время транспортировки собранные биологические жидкости должны быть защищены от воздействия света, температур, механического воздействия.

Как сдавать анализ

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотикам проводится на разных видах биоматериала. В зависимости от их типа необходимо соблюдать следующие предписания специалистов при заборе проб:

  1. Сбор мочи производят по утрам, натощак, после предварительно проведенных гигиенических процедур. Необходимый объем урины составляет от 10 до 15 мл. Забор производят в специальную стерильную посуду, материал должен быть доставлен в лабораторию не позднее чем через два часа.
  2. Мазок на чувствительность к антибиотикам из носоглотки или зева проводят по утрам, до приема пищи и воды и до проведения гигиенических процедур (чистки зубов и полоскания рта).
  3. Сбор кала производится утром, стерильной лопаткой в стерильную посуду, необходимый объем биоматериала – до 30 мг. Недопустимо попадание мочи, использование клизмы или слабительных препаратов, замораживание. Срок доставки в лабораторию не должен превышать 3-5 часов.
  4. Проба мокроты доставляется в место проведения исследования на протяжении часа после забора, который проводят натощак, после предварительной чистки зубов и полоскания рта.
  5. Пробу грудного молока берут после проведения гигиенических процедур и обработки кожи вокруг соска спиртом. Перед забором материала в объеме 5 мл (в стерильную посуду) сцеживают от 15 мл жидкости. Время доставки в лабораторию не должно превышать 2 часов.
  6. Мазок со слизистых влагалища и другие виды забора материала на мочеполовые инфекции. Анализ проводят не ранее чем через 2 недели после окончания менструации (точную дату определит врач на основе данных о месячном цикле). Последнее мочеиспускание должно быть проведено за два часа до взятия пробы у женщин и за 5-6 – у мужчин.
  7. Объем забранной для посева крови у детей составляет 5 мл, у взрослых – 15 мл.

Сколько делается посев

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам проводится в течение некоторого продолжительного времени (по сравнению с готовностью результатов других анализов). Выделение штаммов проводится не одинаково, потому что разные биологические среды человеческого организма требуют индивидуальных подходов. Примерные сроки результатов анализов для разных типов биоматериала:

  • Кал: от 5 дней до недели.
  • Урогенитальные материалы: 4-10 дней.
  • Кровь: 10-14 дней (первые предварительные данные готовы через 3-4 дня).
  • Слизь из зева или носоглотки: от 5 до 7 дней.
  • Посев на флору: 5-10 дней.

Расшифровка

Бактериологический посев на чувствительность к антибиотику дает представление о качественной и количественной оценке исследуемого образца. Качественная оценка (наличие возбудителя) классифицируется по следующим четырем степеням роста:

  1. Первая. При этой степени рост на твердой среде отсутствует, на жидкой регистрируется небольшой рост.
  2. Вторая. Небольшой рост на твердой среде (до 10 колоний).
  3. Третья. Значительный рост на твердой среде (10-100 колоний).
  4. Четвертая. Больше 100 колоний.

При обнаружении в результате исследования условно-патогенной микрофлоры (непатогенных грамотрицательных бактерий) первые две степени относят к норме, при третьей или четвертой степени говорят о присутствии в организме микробов-возбудителей инфекции, размножение которых стало причиной возникновения и развития заболевания. При наличии в материале патогенной микрофлоры все четыре степени свидетельствуют о наличии болезни. Например, сапрофитная микрофлора в бакпосеве мочи свидетельствует об инфекции мочеполовой системы.

Количественная оценка проводится в колониеобразующих единицах (КОЕ), обозначающих объединение (сообщество) клеток бактерий, образовавших колонию. Она помогает установить степень обсемененности и проконтролировать достаточность назначенных для лечения дозировок лекарственных средств (адекватность проведенных медикаментозных назначений). Принято следующее условное соотношение КОЕ и миллилитров:

  • 1 колония – это 103 КОЕ/мл.
  • 1-5 колоний – это 104 КОЕ/мл.
  • 5-15 колоний – это 105 КОЕ/мл.
  • более 15 колоний – это 106 КОЕ/мл

Тест на чувствительность к антибиотикам, проводимый одновременно с посевом на определение возбудителя инфекции, называют антибиотикограммой. Выделив патогенный микроорганизм, его пересаживают в благоприятную для роста среду, где исследуется резистентность (чувствительность) конкретного штамма к активным компонентам антибактериальных препаратов. Чувствительные к антибиотику патогенные клетки не растут в зоне его действия, устойчивые показывают рост колоний.

Распространенным методом проведения антибиотикограммы является метод диффузии смоченных в антибактериальном препарате бумажных полосок в чашке Петри с исследуемой средой. Их выкладывают по поверхности, отступая на два сантиметра от края чашки и от друг друга. После 5-7 часов при комнатной температуре чашу помещают в термостат на срок от 3 до 5 дней. По результатам исследования рост колоний оценивается следующим образом:

  • Кольцо вокруг полоски диаметром от 2,5 см говорит о повышенной чувствительности микрофлоры к препарату;
  • 2,5-1,5 см – стандартная чувствительность (средняя клиническая эффективность).
  • до 1,5 см – слабая реакция, лечение с высокой вероятностью не будет эффективным.
  • Отсутствие задержки роста колонии – полная устойчивость к медикаментозному средству.

Видео

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Нашли в тексте ошибку? Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!

Обсудить

Посев на чувствительность к антибиотикам - показания и расшифровка

Бакпосев на микрофлору – диагностическая процедура, которая подразумевает высеивание мочи или мазков (биологического материала) на определение питательной среды. Проводится такая манипуляция с целью точного установления вида бактерий или грибов, вызвавших развитие той или иной патологии.

Зачастую подобный анализ назначают гинекологи и урологи при подозрении на наличие у пациента венерических болезней, ЗППП и патологических процессов в области мочевыделительной системы и почек. Но показаниями к проведению бакпосева могут стать и другие заболевания, требующие повышенного внимания медиков. Что это за процедура, какова ее суть, и когда она необходима? Давайте разбираться по порядку.

Зачем нужен анализ

Посев мочи на флору – это анализ, который направлен на выявление в образце биологического материала патогенных и условно патогенных бактерий. После определения вида микроорганизмов, обнаруженных в моче или мазке, пациенту назначается вторая диагностическая клиническая процедура – антибиотикограмма.

Она нужна для определения, к каким группам противомикробных препаратов те или иные бактерии более всего чувствительны. То есть, врач на основании полученных данных может назначить пациенту препарат узкого спектра действия, необходимого для ликвидации конкретного вида болезнетворных бактерий.

Выше мы упоминали такой термин, как условно патогенная микрофлора. Ее выявление в биологическом образце тоже имеет довольно большое значение, поскольку помогает предотвратить или излечить болезнь на ранней стадии ее развития.

Что это такое условно патогенная микрофлора? Если говорить простыми словами, то УПМФ – это группы бактерий, которые в норме обитают в организме человека, не причиняя ему никакого вреда. Однако при создании благоприятных условий они способны стремительно размножаться, вызывая развитие патологического процесса в организме своего носителя. Нередко такие бактерии вырабатывают устойчивость к различным группам медикаментозных препаратов (в том числе, и к антибиотикам), что значительно усложняет и удлиняет процесс выздоровления.

Приведем небольшой пример. В норме в организме у каждого здорового человека обитает небольшое количество грибков рода Кандида. Они являются возбудителями такой неприятной патологии, как молочница, или кандидоз. Пока они мирно обитают в клетках, переживать об этом не стоит.

Но как только возникнут неблагоприятные внешние факторы (стресс, переохлаждение и др.), грибки начнут быстро размножаться, приводя к развитию молочницы. То есть, говоря проще, эти грибы считаются потенциально опасными (условно патогенными), однако пока они находятся в состоянии покоя, приписывать себе мнимый хронический кандидоз не стоит.

Каковы плюсы бак посева?

Посев на микрофлору имеет ряд преимуществ перед другими клиническими методиками, направленными на исследование мочи и других биологических образцов. Основными преимущества этого анализа являются:

  • высокая точность, что дает возможность получить максимально правдивые данные;
  • возможность провести тест с любым биологическим материалом – мочой, семенной жидкостью, слюной, мокротой и т. д.;
  • возможность назначить максимально эффективный препарат, с помощью которого можно быстро излечить ту или иную патологию.

Посев мочи на микрофлору имеет также свои недостатки, среди которых на первое место выдвигается довольно продолжительное время ожидания результатов исследования. К тому же собрать материал для такого теста не так просто, как для ОАМ или .

Показания к проведению бак посева на микрофлору

Анализ на посев – довольно распространенный метод тестирования биологического материала, который каждый день назначают сотням пациентов. Однако для этого должны иметься определенные показания, одним из которых является подозрение на наличие болезнетворных микроорганизмов в крови человека.

Так когда принято назначать бактериальный посев? Показаниями к проведению этого теста являются следующие патологии (или подозрение на наличие таковых):

  1. Цистит. В данном случае проводится не только посев на микрофлору, но и на чувствительность к антибиотикам. Почитайте, .
  2. Хламидиоз.
  3. Гонорея.
  4. Трихомониаз.
  5. Уреаплазмоз.
  6. Вагинальный кандидоз.
  7. Бактериальные вагиниты.

Эти заболевания мочеполовой системы чаще всего требуют анализа на микрофлору. Но есть и другие, при которых этот тест тоже играет довольно серьезную роль. Это респираторные патологии инфекционного характера.

  1. Ангина. Любой вид тонзиллита – бактериальный, кандидозный, гнойный и др. – может стать основанием для взятия мазка. В этом случае проводится посев из зева на микрофлору.
  2. Воспаление легких или пневмония – анализ мокроты.
  3. Туберкулез.

Это еще далеко не весь список показаний для проведения бак посева на микрофлору. К тому же исследуется не только урина и мокрота, но также кровь, кал, лимфа и другие материалы.

Цель проведения бактериального посева и расшифровка данных

Бактериологический посев на флору и антибиотикограмма играют важную роль в выявлении болезнетворных бактерий, их разновидности и чувствительности к противомикробным препаратам. Несмотря на то, что эти исследования дополняют друг друга, они имеют разные принципы и способы расшифровки результатов. Для начала давайте разберемся с тем, как проводят бакпосев.

Суть процедуры

Посев на флору и АЧ – это две тесно взаимосвязанные процедуры, поэтому за первой, как правило, сразу же следует вторая. Исключением являются только те случаи, когда в исследуемом биологическом материале не было обнаружено патогенных микроорганизмов.

Примечание. Патогенная флора – это группы различных бактерий, которые не присутствуют в организме у здоровых людей. Их попадание в него происходит под воздействием внешних факторов, и приводит к развитию инфекционных патологий.

Именно на их обнаружение нацелен бактериальный посев.

Как проводится исследование?

Бак посев на флору подразумевает культуральный посев образца биологического материала на питательную среду. При этом учитывается приблизительная группа микроорганизмов, которая, по мнению врача, привела к развитию заболевания у пациента.

Например, если речь идет о герпесвирусной инфекции, соскоб с везикулярной сыпью вживляется в куриный эмбрион. Если на протяжении нескольких суток положительная динамика роста вируса не наблюдается, результат считается отрицательным.

То же самое касается и других патогенных микроорганизмов и грибов. Для каждой группы используется особая среда, которая будет способствовать росту бактерий.

Следующим этапом анализа мочи (или другой биологической жидкости) на микрофлору является помещение питательной среды с проросшей культурой в специальный аппарат – термостат. Там емкость находится на протяжении определенного периода времени.

После окончания положенного отрезка времени емкость извлекается из термостата, затем лаборантом проводится визуальная оценка цвета, количества и плотности прорастания бактериальных колоний. При расшифровке и записи полученных данных используется такое понятие, как колониеобразующая единица, или КОЕ (1 бактериальная клетка). Именно по этому критерию исчисляется количество микроорганизмов в образце биологического материала пациента.

Как прочитать полученные данные?

Расшифровка посева на флору и АЧ играет первостепенную роль в диагностике различных заболеваний. Различают 4 степени бактериальной обсемененности в образце биологического материала.

  1. При первой степени рост микрофлоры очень медленный, практически незаметный. Ее произрастание происходит исключительно в условиях жидкой среды.
  2. Вторая степень характеризуется рост микроорганизмов, относящихся только к одному определенному виду. При этом их число не превышает 10 колоний, и растут они только в довольно плотной среде.
  3. При третьей степени патогенная микрофлора произрастает в плотной твердой среде, но их число не превышает 100 колоний.
  4. При четвертой степени число колоний превышает 100 бактериальных клеток, произрастающих на твердой питательной среде.

Как понять эти данные? Первая и вторая степени свидетельствуют о том, что микрофлора несколько загрязнена, но это не является критическим показателем. Третья и четвертая степени указывают на наличие явного воспалительного или инфекционного процесса, протекающего в организме человека. При этом патологию вызвали именно те микроорганизмы, которые проросли в искусственно созданной лаборантами среде.

Мазок из зева – как прочитать результат?

Расшифровка мазка из зева на микрофлору несколько отличается от той, которая рассчитана под другой биологический материал (сперму, влагалищные выделения, мочу и др.). Чтобы понять данные, записанные на специальном медицинском бланке, необходимо знать, какие показатели считаются самыми оптимальными.

Если лаборант указал на листе, что количество тех или иных бактерий не превышает 10 в 4 степени, это означает, что переживать не о чем. Это допустимая норма для любого пациента.

При превышении количества колоний показателей 10 в 5 степени, то это считается тревожным звонком, извещающим об активном росте условно патогенной микрофлоре в ротовой или носовой полости (в зависимости от того, для подтверждения какого диагноза был взят мазок из зева). Крайне редко лаборант может указать количество микроорганизмов 10 в 1 степени. Это говорит о том, что уровень бактерий слишком мал, чтобы вызвать ту или иную ЛОР патологию.

Как расшифровать данные антибиотикограммы?

Немаловажную роль играет также посев на чувствительность к антибиотикам. Он помогает установить, к каким именно группам противомикробных лекарств более всего чувствителен проросший вид бактерий.

Суть процедуры проста. После определения с помощью бакпосева типа бактерий, вызвавших возникновение у пациента недомогание, с этими микроорганизмами проводится тест на их чувствительность к антибиотикам. Для этого используются те препараты, которые, по мнению врача, целесообразно применять в данном конкретном случае.

Расшифровка данных о чувствительности к антибиотикам может проводиться несколькими способами. Каждый из них довольно информативен, поэтому разобраться с обоими сможет даже человек без медицинского образования.

Способ первый – плюсы

Лаборант выдает бланк, где указан тип возбудителя инфекции, а также список препаратов, которые к нему чувствительны. Возле каждого названия лаборант ставит плюсы – от 1 до 3. Далее расшифровка анализа на чувствительность к антибиотикам проводится по такой схеме (цифра в списке означает количество плюсов).

  1. Резистентность микроорганизмов к данному препарату высока, поэтому применять его нецелесообразно.
  2. Микроорганизмы не слишком чувствительны к медикаментозному средству, поэтому его использование также не приведет к быстрому выздоровлению.
  3. Бактерии высокочувствительны к лекарству, что означает высокую вероятность его эффективности при лечении недуга у больного.

Иногда вместо плюсов могут ставиться «птички» (галочки), расшифровка числа которых соответствует количеству плюсиков, указанных в вышеприведенном списке.

Система обозначения S, R, I

В некоторых бланках вместо галочек и плюсов можно встретить условные буквенные обозначения S, R, I. Многие пациенты ломают голову над тем, что бы это могла означать. На самом деле все довольно просто, к тому же практически во всех медицинских документах, где записываются полученные данные, сбоку дано объяснение, как их трактовать.

Так какой же является расшифровка антибиотикограммы S, R, I?

S – микроорганизмы чувствительны к тому или иному препарату.

R – лечение выбранным лекарством не даст результата по причины высокой резистентности микробов к нему.

I – бактерии умеренно чувствительны, поэтому лучше поискать более эффективное лекарство.

Как видно, «все гениальное – просто». Бак посев мочи и других образцов биологических материалов на чувствительность к антибиотикам помогает не только назначить правильное лечение, но и сохранить драгоценное время, предотвратив тем самым возникновение осложнений имеющегося у пациента заболевания.

Мазок из зева берут для проведения стандартного бактериологического исследования с целью изучения микробного состава и количественного соотношения микрофлоры носоглотки. Это метод лабораторной диагностики, позволяющий выявить возбудителей инфекционно-воспалительных заболеваний верхних отделов респираторного тракта. Для определения этиологии инфекции необходимо провести бактериологическое исследование отделяемого носа и зева на микрофлору.

Специалисты направляют больных с хроническим , и в микробиологическую лабораторию, где стерильным ватным тампоном отбирают биоматериал из носа и зева и проводят его исследование. По результатам анализа специалист определяет возбудителя патологии и его чувствительность к антибиотикам.

Причины и цели взятия мазка на микрофлору из зева и носа:

  • Диагностика , вызванной бета-гемолитическим стрептококком и приводящей к развитию тяжелых осложнений - гломерулонефрита, ревматизма, миокардита.
  • Наличие в носоглотке золотистого стафилококка, провоцирующего образование фурункулов на коже.
  • Бактериологический посев клинического материала при воспалении носоглотки проводится с целью исключения дифтерийной инфекции.
  • Подозрение на менингококковую или коклюшную инфекцию, а также респираторные недуги.
  • Диагностика стенозирующего , абсцессов, расположенных рядом с миндалинами, включает однократное проведение анализа.
  • Лица, контактные с инфекционным больным, а также дети, поступающие в детский сад или школу, проходят профилактическое обследование с целью выявления бактерионосительства.
  • Полное обследование беременных женщин включает взятие мазка из зева на микрофлору.
  • Мазок из зева и носа на стафилококк с профилактической целью сдают все медицинские работники, воспитатели детских садов, повара и продавцы продуктовых магазинов.
  • Мазок из зева для определения клеточного состава отделяемого. Исследуемый материал наносят на специальное предметное стекло. Под микроскопом врач-лаборант подсчитывает количество эозинофилов и прочих клеток в поле зрения. Проводится исследование для определения аллергической природы заболевания.

В баклабораторию направляют больных для исследования материала из носоглотки с целью исключения или подтверждения конкретной инфекции. В направлении указывают микроорганизм, наличие которого необходимо подтвердить или опровергнуть.

Микрофлора носоглотки

На слизистой оболочке зева и носа обитает множество микроорганизмов, составляющих нормальную микрофлору носоглотки. Исследование отделяемого горла и носа показывает качественное и количественное соотношение микробов, обитающих в данном локусе.

Типы микроорганизмов, обитающих на слизистой носоглотки у здоровых людей:

  1. Бактероиды,
  2. Veillonella,
  3. Escherichia coli,
  4. Branhamella,
  5. Pseudomonas,
  6. Streptococcus matans,
  7. Neisseria meningitides,
  8. Klebsiella pneumonia,
  9. Эпидермальный стафилококк,
  10. Зеленящий стрептококк,
  11. Неболезнетворные нейссерии,
  12. Дифтероиды,
  13. Коринебактерии,
  14. Candida spp.,
  15. Haemophilis spp.,
  16. Actinomyces spp.

При патологии в мазке из зева и носа можно обнаружить такие микроорганизмы:

  • Бета-гемолитический группы А,
  • S. aureus,
  • Листерия,
  • Branhamella catarrhalis,
  • Acinetobacter baumannii,

Подготовка к анализу

Чтобы результаты анализа были максимально достоверными, необходимо правильно отобрать клинический материал. Для этого следует подготовиться.

За две недели до забора материала прекращают прием системных антибиотиков, а за 5-7 суток рекомендуют перестать использовать антибактериальные растворы, ополаскиватели, спреи и мази для местного применения. Сдавать анализ следует натощак. Перед этим запрещено чистить зубы, пить воду и жевать жвачку. В противном случае результат анализа может оказаться ложным.

Мазок из носа на эозинофилы сдают также натощак. Если человек поел, необходимо подождать как минимум два часа.

Взятие материала

Чтобы правильно взять материал из зева, пациенты откидывают голову назад и широко раскрывают рот. Специально обученный персонал лаборатории шпателем прижимает язык и собирает отделяемое глотки специальным инструментом – стерильным ватным тампоном. Затем извлекает его из полости рта и опускает в пробирку. Пробирка содержит специальный раствор, которой предотвращает гибель микробов во время транспортировки материала. Пробирку необходимо доставить в лабораторию в течение двух часов с момента забора материала. Взятие мазка из горла – процедура безболезненная, но неприятная. Прикосновение ватного тампона к слизистой глотки может спровоцировать рвотные позывы.

Чтобы взять мазок из носа, необходимо усадить пациента напротив и слегка запрокинуть ему голову. Перед анализом необходимо очистить нос от имеющейся слизи. Кожу ноздрей обрабатывают 70% спиртом. Стерильный тампон вводят поочередно сначала в один, а затем в другой носовой ход, проворачивая инструмент и плотно прикасаясь к его стенкам. Тампон быстро опускают в пробирку и направляют материал на микроскопическое и микробиологическое исследование.

Микроскопическое исследование

Исследуемый материал наносят на предметное стекло, фиксируют в пламени горелки, окрашивают по Граму и изучают под микроскопом с иммерсионным маслом. В мазке обнаруживают грамотрицательные или грамположительные палочки, кокки или коккобациллы, изучают их морфологические и тинкториальные свойства.

Микроскопические признаки бактерий - важный диагностический ориентир. Если в мазке находятся грамположительные кокки, расположенные скоплениями, напоминающими гроздья винограда, предполагают, что возбудителем патологии является стафилококк. Если кокки окрашены по Граму положительно и располагаются в мазке цепочками или парами, возможно это стрептококки; грамотрицательные кокки - нейсерии; грамотрицательные палочки с закругленными концами и светлой капсулой - клебсиеллы, мелкие грамотрицательные палочки - эшерихии, . Дальнейшее микробиологическое исследование продолжают с учетом микроскопических признаков.

Посев исследуемого материала

Каждый микроорганизм растет на своей «родной» среде с учетом рН и влажности. Среды бывают дифференциально-диагностическими, селективными, универсальными. Их основное предназначение – обеспечение питания, дыхания, роста и размножения бактериальных клеток.

Посев исследуемого материала необходимо проводить в стерильном боксе или ламинарном шкафу. Медработник должен быть одет в стерильную одежду, перчатки, маску и бахилы. Это необходимо для соблюдения стерильности в рабочей зоне. В боксе следует работать молча, аккуратно, обеспечивая личную безопасность, поскольку любой биологический материал считается подозрительным и заведомо заразным.

Мазок из носоглотки засевают на питательные среды и инкубируют в термостате. Спустя несколько суток на средах вырастают колонии, имеющие различную форму, размер и цвет.

Существуют специальные питательные среды, которые являются селективными для конкретного микроорганизма.

Материал втирают тампоном в среду на небольшой площадке размером 2 кв. см., а затем с помощью бактериологической петли штрихами рассевают по всей поверхности чашки Петри. Посевы инкубируют в термостате при определенной температуре. На следующий день посевы просматривают, учитывают количество выросших колоний и описывают их характер. Пересевают отдельные колонии на селективные питательные среды для выделения и накопления чистой культуры. Микроскопическое изучение чистой культуры позволяет определить размер и форму бактерии, наличие капсулы, жгутиков, спор, отношение микроба к окрашиванию. Идентифицируют выделенные микроорганизмы до рода и вида, при необходимости проводят фаготипирование и серотипирование.

Результат исследования

Результат исследования врачи-микробиологи выписывают на специальном бланке. Для расшифровки результата мазка из зева требуются значения показателей. Название микроорганизма состоит из двух латинских слов, обозначающих род и вид микроба. Рядом с названием указывают количество бактериальных клеток, выраженное в особых колониеобразующих единицах. После определения концентрации микроорганизма переходят к обозначению его патогенности – «флора условно-патогенная».

У здоровых людей на слизистой оболочке носоглотки живут бактерии, выполняющие защитную функцию. Они не доставляют дискомфорта и не вызывают развития воспаления. Под воздействием неблагоприятных эндогенных и экзогенных факторов количество этих микроорганизмов резко увеличивается, что приводит к развитию патологии.

В норме содержание сапрофитных и условно-патогенных микробов в носоглотке не должно превышать 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, а патогенные бактерии должны отсутствовать. Определить патогенность микроба и расшифровать анализ может только врач, обладающий специальными навыками и знаниями. Доктор определит целесообразность и необходимость назначения больному противовоспалительных и антибактериальных препаратов.

После выявления возбудителя патологии и его идентификации до рода и вида переходят к определению его чувствительности к фагам, антибиотикам и противомикробным препаратам. Лечить заболевание горла или носа необходимо тем антибиотиком, к которому выявленный микроб максимально чувствителен.

результатов исследования мазка из зева

Варианты результатов исследования мазка из зева:

  • Отрицательный результат посева на микрофлору – возбудители бактериальной или грибковой инфекции отсутствуют. В этом случае причиной патологии являются вирусы, а не бактерии или грибы.
  • Положительный результат посева на микрофлору – наблюдается рост патогенных или условно-патогенных бактерий, способных вызвать острый фарингит, дифтерию, коклюш и прочие бактериальные инфекции. При росте грибковой флоры развивается кандидоз полости рта, возбудителем которого являются биологические агенты 3 группы патогенности – дрожжеподобные грибы рода Candida.

Микробиологическое исследование отделяемого зева и носа на флору позволяет определяют вид микробов и их количественное соотношение. Все патогенные и условно-патогенные микроорганизмы подлежат полной идентификации. Результат лабораторной диагностики позволяет врачу правильно назначить лечение.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче , и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

  • Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают ;
  • Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
  • Наличием патогенных микробов , которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов , которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

  • Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
  • Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
  • Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

  • У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
  • У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
    1. дифтероидами;
    2. стафилококками;
    3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала , перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку , окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14 , поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный (обычно это Candida albicans), и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает , приносящая большой вред не только при беременности . Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

  • Бактериальной петлей;
  • Пастеровской пипеткой;
  • Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

  1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
  2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
  3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1: 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

  • Размер и форму бактериальной клетки;
  • Наличие капсул, жгутиков, спор;
  • Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном . Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

Посев на флору и чувствительность к антибиотикам: что это за анализ

Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам (посев на флору и ач), что это такое и для каких целей проводится данный анализ. Это микробиологический метод исследования, который используют с целью получения точных данных о составе микрофлоры, титре обнаруженных условно-патогенных бактерий, а также их восприимчивости к тому или иному антибактериальному средству.

Расшифровка анализа посев на флору и ач может содержать только количество лактобактерий в какой-то степени, например, 10 в 6 степени. Это норма, лечения не требуется. При таком результате у женщины не должно быть никаких недомоганий - необычных выделений, неприятного запаха из влагалища, зуда, если анализ брался из цервикального канала. Если вас интересует что значит "посев на флору и ач роста микрофлоры не выявлено", то это абсолютная норма. А вот если указан микроорганизм, то это означает, что именно он вызывает неприятную симптоматику. Опять же, в случае с гинекологией может быть обнаружена, например, кишечная палочка. Вообще, этот микроорганизм в норме есть в нашем организме, но не везде, только в кишечнике. При ношении же узких трусиков, после бурного секса, плохо соблюдаемой личной гигиене, кишечная палочка может попасть во влагалище и уретру, вызвав кольпит и цистит, соответственно.

Но анализируют не только состав бактерий, обитающих на слизистой половых органов, но и во рту, горле, эякуляте, желчи, в носу и пр. Посев мочи на флору и чувствительность к антибиотикам часто назначается урологами. Таким образом корректируется назначенное лечение, ведь не всегда антибиотики даже широкого спектра действия помогают.

Минусом данного вида исследования является только то, что его довольно долго делают, до семи дней, по этой причине многие врачи, особенно в муниципальных поликлиниках, не частных, не любят назначать этот анализ. Но все же иногда без него не обойтись. И тогда многое зависит от подготовки женщины, ее знаний о том, как правильно готовиться к анализу, что можно делать незадолго до него, а что может исказить его результат.

Например, прием антибактериальных препаратов местно и системно. Нельзя сдавать анализ сразу после антибиотикотерапии, и тем более во время ее проведения.

Анализ мочи должен сдаваться утром, не на фоне приема мочегонных средств. Собирается биоматериал в стерильную емкость. Нужно исключить попадание в него мельчайших частичек кожи и вагинальных выделений . Во время маточного кровотечения или менструации можно сдавать анализ только в крайнем случае.

Точно так же не имеет смысла сдавать мазок из влагалища на посев во время месячных или в течение 2-3 суток после их окончания.

И это далеко не все требования. Если врач назначил вам этот анализ, отнеситесь к нему серьезно и заранее выясните все нюансы.



Loading...Loading...